不同处理对凤丹牡丹种子萌发的影响

开展了凤丹牡丹(Paeonia ostii T.Hong et J.X.Zhang)种子的特性观测并进行了种子分级试验;采用不同浸种温度、不同浸种时间、沙藏层积、不同浓度激素处理凤丹牡丹种子,筛选出能够促进种子萌发的最佳处理方式。结果表明,利用凤丹种子的比重不同,采取水浸法进行种子分级,能有效区分种子优劣,且Ⅱ级种子的发芽率最高,达到99%;赤霉素(GA3)处理能大幅提高播种出苗率,GA3促进种子萌发的的最佳浓度为150 mg/L,种子萌发率达到99%。种子的品质与质量相关性不大,与吸水率呈反比;凤丹牡丹种子萌发需要一定的生理后熟期。     

凤丹牡丹ANS(PoANS)基因克隆、特性及表达

通过RT-PCR技术,从凤丹牡丹花瓣中克隆出编码ANS基因的c DNA序列,并对其进行生物信息学分析。对不同开花阶段的凤丹花瓣进行实时荧光定量及总花青素质量分数测定,构建原核表达载体PET-28aANS,并转化大肠杆菌BL21感受态,经IPTG诱导进行体外表达。结果表明:该序列编码区域共1 065 bp,编码354个氨基酸,其蛋白相对分子质量为40 475.5,亚细胞定位为细胞质的可能性最大;表达分析显示,ANS基因表达水平与不同开花时期的总花青素质量分数及花色相关,原核表达得到相对分子质量约为44 000的ANS-His-tag融合蛋白,与预测蛋白大小相一致。     

凤丹胚乳内源抑制物质活性及其成分的GC-MS鉴定

【目的】研究凤丹种子胚乳中内源抑制物质活性及其成分组成,为了解其休眠机理提供参考。【方法】采用系统溶剂分离法,分离萃取凤丹胚乳中的内源抑制物质,对4种有机溶剂(石油醚、乙酸乙酯、乙醚、甲醇)萃取液和水相进行白菜种子发芽试验,确定发挥抑制作用的优势组分,并对其成分进行GC-MS分析。【结果】凤丹种子胚乳各有机溶剂萃取液对白菜种子发芽率和幼苗苗高生长、根长生长均有不同程度的抑制作用,但抑制物质活性存在一定差异。4种有机溶剂萃取液中抑制作用最强的是乙醚组分,其次是甲醇组分,再次是乙酸乙酯组分。利用GCMS方法从乙醚组分中共检出6种物质,主要为乙酸(66.661%)、甲酸(25.996%)、乙酐(2.399%)、苯酚(2.217%)等;从乙酸乙酯组分中共检出11种物质,主要为乙酸(56.343%)、甲酸(14.772%)、DL-3-乙基乙酸丁酸酯(6.266%)、乙酐(4.834%)等;从甲醇组分中共检出33种物质,主要为苯甲酸(32.631%)、1,3-二羟基丙酮(10.997%)、5-羟甲基糠醛(8.964%)、乙酸(5.751%)等;这些物质中被证实有抑制活性的是乙酸和苯甲酸;GC-MS检出物主要为有机酸类、酮类、酯类和醛类等,不同组分中相对含量高的均为有机酸类物质。【结论】乙醚萃取液中的化合物可能是导致凤丹种子萌发受抑制的主要物质。     

凤丹浸提液对玉米种子萌发和幼苗生长的影响

采用凤丹不同部位浸提液处理玉米种子和幼苗,通过测定玉米种子发芽率、发芽势及幼苗的一些形态指标和生理指标,研究凤丹浸提液对玉米种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,凤丹不同部位浸提液对玉米种子萌发和幼苗生长有一定程度的抑制作用,抑制顺序表现为根浸提液根际土浸提液茎和叶浸提液。从化感效应指数看,在种子萌发过程中,玉米种子发芽势和发芽指数受凤丹浸提液影响显著;而在幼苗生长阶段,玉米幼苗根系活力和过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性对各浸提液的处理较敏感,上述指标可以作为衡量凤丹不同部位浸提液对其化感作用强度的指标。     

气相色谱法测定元胡、浙贝母和白芍中嘧霉胺残留

建立了一种测定元胡、浙贝母和白芍3种中药材中嘧霉胺残留的气相色谱分析方法。样品经二氯甲烷提取,液-液分配,柱层析[m（中性氧化铝）:m（弗罗里硅土）=3:2]净化,气相色谱-氮磷检测器（GC-NPD）检测,基质匹配外标法定量,同时经气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）验证。结果表明:在0.02~10 mg/L范围内,分别以正己烷和3种空白基质溶液为溶剂配制嘧霉胺的标准工作溶液,峰面积与相应的质量浓度间呈良好的线性关系,R2均大于0.999;在0.01（元胡中为0.02）、0.1和0.5 mg/kg 3个添加水平下,添加回收率为75%~104%,日内相对标准偏差（RSD）为1.3%~10.2%（n=5）,日间RSD为1.2%~9.0%（n=3）。分析方法在元胡、浙贝母和白芍中的定量限（LOQ）分别为0.02、0.01和0.01 mg/kg。该方法的灵敏度、准确度及精密度均符合农药残留分析要求,且简单易行,净化效果好,适用于元胡、浙贝母和白芍中嘧霉胺分析。     

牡丹根际微生物区系及土壤酶活的研究

为了解牡丹种植对土壤微生态系统的影响,以多年种植牡丹的土壤为研究对象,对其根际微生物区系及根际土壤酶活性进行研究。结果表明：牡丹根际土壤微生物总数量大于非根际土壤,两类土壤中细菌占主要优势,但非根际土壤中真菌的含量高于根际土壤。根际土壤脲酶、碱性磷酸酶和中性磷酸酶的活性分别比非根际土壤增加了38．40％、81．76％和129．42％,多酚氧化酶差异不大,而非根际土壤中的过氧化氢酶比根际土壤增加了5．31％。     

成品保鲜剂对芍药切花保鲜效果的影响

[目的]研究不同成品保鲜剂及其组合对切花芍药瓶插保鲜效果的影响。[方法]选取进口芍药‘珊瑚魅力’为试材,选择2种成品保鲜剂及其组合对切花芍药进行处理,调查瓶插期间切花芍药的瓶插寿命、花朵直径和花朵开放进程等指标。[结果]保鲜剂组合(可利鲜∶花之寿=1∶1)处理的效果最好,瓶插期比对照CK增加3 d。保鲜剂可利鲜对芍药切花花径的增大有促进作用,而花之寿对切花花径增大的作用不明显。[结论]为花店或切花生产供应商延长芍药切花瓶插寿命提供参考。     

20个芍药切花品种遗传多样性的AFLP分析

为了探索不同芍药切花品种之间的亲缘关系特征,利用荧光标记AFLP分子标记技术,采用9 对PstI /MseI 引物组合对20 个芍药切花品种进行了DNA遗传多样性分析。结果表明：9 对引物均显示多态性,共产生谱带733 条,其中多态性条带699 条,多态性位点平均为95.36%,Nei 基因多样性指数为1.4163~1.5552,平均1.4740;Shannon 信息指数为0.4197~0.4929,平均0.4490。经UPGMA聚类分析后,20 份芍药品种的Dice 相似系数0.458~0.741,在相似系数0.52 处,可将供试的20 个切花芍药品种分为5类。研究认为,药芍品种间的遗传差异较大,具有丰富的遗传多样性,为芍药品种分类及亲缘关系分析提供参考依据。     

63个芍药品种的分类检索

2014—2016年对63个芍药品种及野生原种进行形态特征调查,选定叶缘、花器管中心皮的形态特征作为品种分类的关键性状,结合花型、花色制作芍药品种分类检索表,以期为芍药品种鉴定、应用及新品种选育提供有价值的参考依据。调查供试品种的花期、平均株高、叶片被毛、花态、花茎硬度、每茎最多开花量、花型、花色、心皮被毛、柱头与子房壁的颜色。以叶缘具齿及心皮被毛与否确定品种种源,结合花型、花色进行分类检索。用XTL-850P研究型体视显微镜,观察每个品种的叶缘、心皮被毛、子房及柱头颜色并拍照;花器官颜色的测定采用第6版英国皇家园艺协会比色卡(RHSCC)进行。调查显示：63个品种加原种的叶缘,均带有白色透明骨质细齿,鉴定为芍药(Paeonia lactiflora)种下的栽培品种;其中26个品种心皮光滑无毛,划分为芍药原种品种群;35个品种心皮被毛,划分为毛果芍药品种群;2个品种心皮瓣化无子房无法细分,确定划分为心皮瓣化芍药品种群;结合花型、花色、柱头与子房壁的色型,编制品种的分类检索表;芍药的花期随不同年份、不同地区的气候会有差异,但品种对应的早、中、晚花期的顺序无变化。供试芍药品种种源细分芍药原种品种群、毛果芍药品种群及心皮瓣化芍药品种群;心皮特征是鉴别芍药种下相似品种的关键性状,结合花型、花色、柱头与子房壁的色型编制的分类检索表方便芍药品种的辨识,对芍药品种分类、园林应用和新品种的审定等方面具有一定的参考价值。后期将扩大芍药品种数量规模,对中国芍药品种种源做全面系统的分析认证。     

不同生境条件下凤丹生长及光合特性比较

设置林下(郁闭度0.6)和空旷地两种生境,比较不同生境下凤丹生长及光合特性,探讨凤丹优化栽培的合适生境.结果表明:林下生境的凤丹冠幅面积、一级分枝数、单株挂果量及单位冠幅面积挂果量均优于空旷生境,而前者树高略低于后者.林下生境的凤丹叶绿素a和叶绿素b分别高出空旷生境的103.53%和122.86%,差异具有统计学意义(p0.05).在光合日变化规律方面,林下生境的凤丹净光合速率呈现明显的"单峰"曲线,而空旷生境下的呈不明显"双峰"曲线,总体上前者高于后者;前者胞间CO_2浓度和蒸腾速率低于后者而气孔导度无明显变化趋势;林下生境的光能利用效率和水分利用效率普遍显著高于空旷生境.林下生境因存在一定程度的遮荫,阻挡了夏季强光对凤丹的不良影响,同时也减少了林下的光合有效辐射,但凤丹自身的特性或适应性使得光能和水分利用率高,净光合速率高,有机物合成多,分枝多,植物长势好.